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附件六
2017-07-03 10:40   审核人:

 

设备名称

倒置荧光显微镜

厂家型号

Leica   DMI8

存放地点

A103

负责人

袁媛

联系电话

18904051092

主要功能

HE染色、免疫组化及免疫荧光的图像采集

使用流程

有明场、相差、荧光三种模式。

1.        开机顺序:显微镜——电脑——相机——软件。

2.        明场模式:将附件1中“2”调整为BF,将“3”调整为0,将“4”调整为向下(光源打开)。

3.        相差模式:将附件1中“2”、“3”和物镜相统一,例如,要拍5×相差模式,将“2”调整为IP0,将“3”调整为5×,将物镜调整为5×,将“4”调整为向下(光源打开)。

4.        荧光模式:将附件1中“2”放在空白处,将“3”调整为0,将“4”调整为向上(光源关闭),旋转“5”切换荧光颜色。

5.        双击软件Micro Manager 1.4——点击Live实时——可选Autostratch自动调整对比度,也可手动调整对比度——点击画面窗口下方Snap拍照——点击Save选择第一项保存照片。每张照片都保存在独立的文件夹(请保存在D盘,勿放在桌面)

6.        打开文件夹,将照片拖入点击image J软件打开,点击菜单image——adjust根目录下第一项调整亮度、对比度。

7.        相机为黑白相机,拍摄照片后需添加伪彩:点击image J软件的菜单image——lookup tables——选择颜色——点击apply

8.        点击image J软件的菜单File——Save保存一个新文件。

9.        如需叠加几张照片,需分别打开,点击image J软件的菜单image——color——merge channels——各色通道分别选择照片——ok——另存。

10.    如需拆分图片,Image——color——Split Channels

11.    如需剪切,选中形状——在图上圈出剪切区域——Image——Crop即可。

12.    如需加标尺:点击Analyze——Set Scale——更改“Distance in pixels”和“Known distance”参数,如下图:

参数\物镜倍数10×20×40×Distance in pixels111Known distance0.650.3250.1625

继续点击:Analyze——Tools——Scale Bar——第一栏设置为100——确定。

13.    关机顺序:软件——相机——显微镜——电脑。

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