有明场、相差、荧光三种模式。 1. 开机顺序:显微镜——电脑——相机——软件。 2. 明场模式:将附件1中“2”调整为BF,将“3”调整为0,将“4”调整为向下(光源打开)。 3. 相差模式:将附件1中“2”、“3”和物镜相统一,例如,要拍5×相差模式,将“2”调整为IP0,将“3”调整为5×,将物镜调整为5×,将“4”调整为向下(光源打开)。 4. 荧光模式:将附件1中“2”放在空白处,将“3”调整为0,将“4”调整为向上(光源关闭),旋转“5”切换荧光颜色。 5. 双击软件Micro Manager 1.4——点击Live实时——可选Autostratch自动调整对比度,也可手动调整对比度——点击画面窗口下方Snap拍照——点击Save选择第一项保存照片。每张照片都保存在独立的文件夹(请保存在D盘,勿放在桌面)。 6. 打开文件夹,将照片拖入点击image J软件打开,点击菜单image——adjust根目录下第一项调整亮度、对比度。 7. 相机为黑白相机,拍摄照片后需添加伪彩:点击image J软件的菜单image——lookup tables——选择颜色——点击apply。 8. 点击image J软件的菜单File——Save保存一个新文件。 9. 如需叠加几张照片,需分别打开,点击image J软件的菜单image——color——merge channels——各色通道分别选择照片——ok——另存。 10. 如需拆分图片,Image——color——Split Channels。 11. 如需剪切,选中形状——在图上圈出剪切区域——Image——Crop即可。 12. 如需加标尺:点击Analyze——Set Scale——更改“Distance in pixels”和“Known distance”参数,如下图: 参数\物镜倍数10×20×40×Distance in pixels111Known distance0.650.3250.1625继续点击:Analyze——Tools——Scale Bar——第一栏设置为100——确定。 13. 关机顺序:软件——相机——显微镜——电脑。 |