原核显微注射

服务介绍

原核显微注射：利用原核显微注射技术，将目的DNA注入小鼠或大鼠的受精卵原核中，注射完毕后，将受精卵移植入假孕母鼠输卵管内，待仔鼠出生后，用PCR方法筛选整合外源基因的阳性仔鼠。

胚胎供体品系：小鼠【C57BL/6】 大鼠【SD】

假孕受体品系：小鼠【ICR】 大鼠【SD】

内容包括：

显微注射前基因的处理。

• SPF级供体鼠与受体鼠的准备。

• 供体鼠超数排卵与正常雄鼠交配。

• 输精管结扎的雄鼠和雌鼠交配产生假孕母鼠。

• 受精卵的收集及体外培养。

• 将客户的基因稀释为注射浓度，注射约300枚受精卵的原核。

• 把注射后所有成活的胚胎移植到假孕母鼠的输卵管中。

• 监测移植母鼠和出生的仔鼠。

• 仔鼠剪脚趾编号，性别鉴定及剪鼠尾巴进行样本的提取和DNA水平鉴定。

• 离乳及转基因鼠的移交。

服务周期：

原核显微注射服务开始到生产出转基因首建鼠所需时间约8周。其中包括用于原核显微注射的目的DNA片段准备1周；供体鼠进行超数排卵和收集胚胎，将注射目的DNA的成活胚胎移植到假孕母鼠输卵管内1周；妊娠3周；仔鼠出生后约3周内完成鼠尾DNA提取及PCR鉴定，筛选出整合外源基因的阳性仔鼠。

申请流程

• 客户咨询（咨询电话：18900910246)。

• 填写《原核显微注射申请表》。

• 签订《原核显微注射协议书》。

• 客户将基因构建载体邮寄到实验室后，实验技术服务开始进行。