囊胚显微注射
服务介绍
囊胚显微注射:将打靶成功的ES细胞显微注射到小鼠囊胚中,将注射后成活的囊胚移植入假孕母鼠子宫内,获得嵌合体小鼠,将嵌合体小鼠和野生型小鼠交配,获得来源于打靶ES的基因修饰小鼠。
囊胚供体品系:小鼠【C57BL/6】
假孕受体品系:小鼠【ICR】
内容包括:
● 显微注射前ES细胞的扩增、培养、处理。
● SPF级供体鼠与受体鼠的准备。 、
● 供体鼠超数排卵与正常雄鼠交配。
● 输精管结扎的雄鼠和雌鼠交配产生假孕母鼠。
● 囊胚的收集及体外培养。
● 将ES细胞处理稀释为注射密度并注射入约50枚囊胚腔中。
● 把注射后所有成活的囊胚移植到假孕母鼠的子宫中。
● 监测移植母鼠和出生的嵌合体仔鼠。
● 嵌合体雄性仔鼠与雌鼠交配,获得F1代仔鼠。
● F1代仔鼠剪脚趾编号,性别鉴定及剪鼠尾巴进行样本的提取和DNA水平鉴定。
● 离乳及打靶ES的基因修饰小鼠的移交。
服务周期
ES细胞囊胚注射服务开始到获得F1代小鼠所需时间约24周。其中包括用于囊胚注射的ES细胞的准备2周;供体鼠进行超数排卵和收集囊胚,将注射ES细胞的成活囊胚移植入假孕母鼠子宫内3周;妊娠3周;仔鼠出生后获得嵌合体雄性小鼠;9周后嵌合体雄性小鼠性体成熟后与雌鼠交配;交配1周;妊娠3周;仔鼠出生后约3周内完成鼠尾DNA提取及PCR鉴定,获得来源于打靶ES的基因修饰小鼠。
申请流程
● 客户咨询(咨询电话:18900910246)。
● 填写《囊胚显微注射申请表》。
● 签订《囊胚显微注射协议书》。
● 客户将需注射的ES细胞邮寄到实验室后,实验技术服务开始进行。